Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 219 - 226, 2006

VALORES HEMATOLÓGICOS DE LA TORTUGA VERDE
(Chelonia mydas) PRESENTE EN LA ALTA GUAJIRA

Hematological Values of the Green Turtle (Chelonia mydas) Present in the High Guajira

Alfredo José Montilla Fuenmayor ¹, Jim Lenrry Hernández Rangel ¹ y Mary Cruz Alvarado Árraga²

¹Laboratorio de Investigaciones Piscícolas, Facultad Experimental de Ciencias. Teléfono: 0261 7597762. Fax: 0261 7598109. E-mail: alfredojmf@cantv.net. ²Laboratorio de Diagnóstico Clínico, Policlínica Veterinaria, Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela.

RESUMEN

La tortuga verde (Chelonia mydas) es probablemente la tortuga marina más conocida debido a su histórico valor alimenticio y la cantidad de investigaciones que han sido conducidas para su conservación, esta tortuga está declarada nacional e internacionalmente como Especie en Peligro de Extinción. Con la finalidad de obtener valores hematológicos de referencia de Ch. mydas, fueron capturadas un total de treinta tortugas colocando redes en la línea de costa del Golfo de Venezuela, alta Guajira. Se obtuvo sangre de los animales realizando punción de los senos cervicales dorsales; en las muestras extraídas se determinaron los parámetros: Recuento de Glóbulos Rojos (RGR), Recuento de Glóbulos Blancos (RGB), Hematocrito (Hcto), Volumen Globular Medio (VGM) y Recuento Diferencial de Leucocitos. Fueron medidos el largo curvo del caparazón (LCC) y ancho curvo de caparazón (ACC) con el fin de estimar el grupo etáreo de los animales. Los valores promedios de los parámetros hematológicos fueron RGR (0,42 × 10⁶µL), RGB (6,16 × 10³µL), Hcto (29,40%), VGM (730,17 fL). El recuento diferencial de leucocitos fue: Heterófilos (82,9%-5,1023 × 10³/µL), Linfocitos (14,7%-0,9081 × 10³/µL), Eosinófilos (0,47%-0,0236 × 10³/µL), Monocitos (1,97%-0,1259 × 10³/µL). Estos resultados coinciden con los intervalos de referencia documentados para la especie. La variabilidad en algunos de los parámetros evaluados podría ser atribuida a factores como edad, sexo, estado reproductivo, estrés, temperatura, técnicas de captura y métodos de análisis.

Palabras clave:  Chelonia mydas, valores hematológicos, alta Guajira.

ABSTRACT

The green turtle (Chelonia mydas) is probably the more well-known sea turtle due to its historical food value and significant amount of research that has been for its conservation,is declared national and internationally as an endangered species of Extinction. In order to determine reference hematological values for Ch. mydas a total of thirty turtles were captured placing nets in the line of coast from Gulf of Venezuela, high Guajira. Blood samples were taken from the dorsal cervical sinuses in all the animals. Red Blood Cell (RBC), White Blood Cell (WBC), Packed Cell Volume (PCV), Mean Corpuscular Volume (MCV), differential count of leukocytes were measured. The curved carapace length (CCL) and curved carapace width (CCW) were measured in order to estimate the turtles´age. The values averages of the hematological parameters were RBC (0.42 × 10⁶µL), WBC (6.16 × 10³µL), PCV (29.40%), MCV (730.17 fL), Heterophils (82.9%-5.1023 × 10³/µL), Lymphocytes (14.7%-0.9081 × 10³/µL), Eosinophils (0.47%-0.0236 × 10³/µL), Monocytes (1.97%-0.1259 × 10³/µL). These results coincide with the reference intervals documented for the species. The variability in some of the parameters evaluated could be attributed to factors as age, sex, reproductive state, stress, temperature, capture technique and analysis methods.

Key words:  Chelonia mydas, hematological values, high Guajira.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 227 - 231, 2006

VARIACIONES DE LA FRAGILIDAD OSMÓTICA ERITROCITARIA
EN BOVINOS A PASTOREO SOBRE PRADERAS CON BAJO CONTENIDO DE SELENIO Y SUPLEMENTADOS O NO CON SELENIO

Variations of the Erythrocyte Osmotic Fragility in Cattle Grazing on Pastures
with Low Selenium Content with or Without Supplement with Selenium

Ricardo Hugo Chihuailaf Vivanco^1,2, Fernando Germán Wittwer Menge¹ y Pedro Alberto Contreras Barriga¹

¹Instituto de Ciencias Clínicas Veterinarias. ²Becario Mecesup, Facultad de Ciencias Veterinarias,
Universidad Austral de Chile, Casilla 567. Valdivia, Chile. E-mail: rchihuailaf@uach.cl

RESUMEN

El selenio es constituyente de la enzima antioxidante glutatión peroxidasa (GSH-Px; E.C.1.11.1.9). La deficiencia de selenio en bovinos disminuye la actividad sanguínea de GSH-Px, predisponiendo a las membranas celulares a sufrir un daño oxidativo. La susceptibilidad de los eritrocitos bovinos al estrés oxidativo puede estimarse mediante la prueba de fragilidad osmótica eritrocitaria (FOE). Con el propósito de evaluar la FOE en bovinos a pastoreo sobre praderas con bajo contenido en selenio, en diferentes periodos del año, se emplearon dos grupos de 16 vaquillas, que pastoreaban praderas con un contenido de selenio inferior a 0,04 ppm. En el mes de marzo, un grupo (Se+) fue suplementado con selenio (Deposel^®) y el otro grupo (Se-) se mantuvo sin suplementación. Muestras de sangre fueron obtenidas de cada vaquilla previo a la suplementación y luego mensualmente en 10 ocasiones. La FOE se determinó utilizando la técnica descrita por Schalm. La actividad de GSH-Px se midió usando un reactivo comercial (Ransel^®). La suplementación con selenio incrementó la actividad de GSH-Px a valores considerados adecuados (> 130 U/g Hb). En el grupo Se-, la actividad de GSH-Px fluctuó entre 60-100 U/g Hb. La FOE no registró diferencias entre grupos a la concentración de NaCl 0,55%; sin embargo, ambos grupos mostraron una disminución de la FOE, es decir un aumento en la resistencia de las membranas, desde septiembre, coincidente con el periodo de primavera en el hemisferio sur. Al parecer la pradera en este periodo favorece el aporte de nutrientes antioxidantes relevantes en la protección de las membranas.

Palabras clave:

Fragilidad osmótica eritrocitaria, estrés oxidativo, selenio, bovinos.

ABSTRACT

Selenium is a part of antioxidant enzyme glutathione peroxidase (GSH-Px; E.C.1.11.1.9). In cattle, the selenium deficiency has been associated with decreased activity of glutathione peroxidase leading to an increase in oxidative damage of cells. The oxidative stress in erythrocytes from cows can be estimated by erythrocyte osmotic fragility test (EOF). To assess EOF as biomarker of oxidative stress in cattle grazing on pastures with low selenium content during different seasons of the year, two groups of sixteen heifers each were used. They were grazed on pastures with 0.04 ppm selenium content. In March one group (Se+) was supplemented with selenium (Deposel^®) and another (Se-) was maintained unsupplemented. Blood samples were obtained from each heifer prior to supplementation and then one time each month for ten months. The EOF was determined using a technique described by Schalm. The GSH-Px activity was measured using a commercial kit (Ransel^®). The GSH-Px activity was increased by selenium supplementation to adequate levels (> 130 U/g Hb). The GSH-Px activity in Se- group was 60-100 U/g Hb. No differences between groups were detected in the EOF values, at 0.55% NaCl concentration; however, both groups showed decreased EOF values after September, coincident with the spring season in the southern hemisphere. Seemingly in this period, the more rapidly growing pasture grass increased in levels of some others factors that lead to increased protection against oxidative damage to erythrocytes.

Key words: Erythrocyte osmotic fragility, oxidative stress, selenium, cattle.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 232 - 238, 2006

CARACTERIZACIÓN TOXINOLÓGICA DEL VENENO TOTAL
DE LA SERPIENTE DE CASCABEL Crotalus durissus cumanensis (VIPERIDAE), PRESENTE EN LA LOCALIDAD DE PORSHOURE, GUAJIRA VENEZOLANA

Toxinological Characterization of the Whole Venom of the Rattlesnake
Crotalus durissus cumanensis (Viperidae) from Porshoure, Venezuelan Guajira

Rafael del Carmen Pirela De las Salas¹, Juan Carlos López-Jonsthon² y Jim Lenrry Hernández Rangel¹

¹Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. ²Laboratorio de Investigaciones,
Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela. Caracas, Venezuela.
Teléfonos: Int-58-261-7831476, 58-414-3640345. Fax: int-58-261-7598109. E-mail: rafael_pirela@walla.com

RESUMEN

En el presente trabajo se caracterizó toxinológicamente el veneno total de la serpiente de cascabel Crotalus durissus cumanensis presente en la localidad de Porshoure, Guajira venezolana, determinando: dosis letal cincuenta (DL₅₀), actividad hemorrágica, actividad edematizante, actividad hemolítica indirecta, actividad coagulante sobre plasma humano (in vitro) y actividad desfibrinante (in vivo), según las metodologías establecidas por la Organización Mundial de la Salud. Los resultados obtenidos mostraron que el veneno de esta subespecie es altamente tóxico, de naturaleza neurotóxica y coagulante. A nivel local produjo poca hemorragia y edema al compararlo con el veneno de otras serpientes de la misma subespecie, entre ellas Crotalus durissus cumanensis de  la Villa del Rosario, estado Zulia; Crotalus durissus terrificus y Crotalus durissus durissus de Costa Rica y Brazil; Crotalus durissus terrificus de Colombia; Crotalus durissus ruruima, Crotalus durissus cascavella, Crotalus durissus collilineatus, entre otras. También resultó ser poco hemolítico y con características desfibrinantes (in vivo); efecto que hasta ahora no había sido reportado para serpientes pertenecientes al género Crotalus, lo que sin duda alguna constituye un valioso aporte para el diagnóstico y tratamiento del accidente crotálico en Venezuela.

Palabras clave:  Crotalus durissus cumanensis, Viperidae, guajira venezolana, veneno, caracterización toxinológica.

ABSTRACT

The whole venom of the rattlesnake Crotalus durissus cumanensis (Viperidae) from Porshoure, Venezuelan Guajira, was characterized toxinologically in this research, determining: lethal dose 50 (LD₅₀),  bleeding, edematic and hemolytic activity, coagulant activity on human plasma (in vitro) and fibrinolytic  activity, according to the methodologies outlined by the World Health Organization. The results demonstrated that the venom of the studied species is highly toxic, neurotoxic and coagulant. Local effects such as the hemorrhage and edema were not highly marked in comparison with other snakes’ venoms of the same subspecies as Crotalus durissus cumanensis from La Villa del Rosario, Zulia state; Crotalus durissus terrificus from Costa Rica and Crotalus durissus durissus from Brazil; Crotalus durissus terrificus from Colombia and Crotalus durissus ruruima, Crotalus durissus cascavella and Crotalus durissus collilineatus. The venom was slightly hemolytic and with fibrinolytic characteristic (in vivo). This effect has not yet been described within the genus Crotalus, what is a significant addition to the information of diagnosis and treatment of the rattlesnake bites in Venezuela.

Key words:  Crotalus durissus cumanensis, Viperidae, Venezuelan guajira, venom, toxinological characterization

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 239 - 248, 2006

PRODUCCIÓN, COMPOSICIÓN QUÍMICA Y DEGRADABILIDAD RUMINAL IN SITU DE Brachiaria humidicola (RENDLE) SCHWEICK EN EL BOSQUE SECO TROPICAL

Yield, Chemical Composition and Ruminal Degradability
of the Brachiaria humidicola (Rendle) Schweick in Tropical Dry Forest

Juan Vergara-López² y Omar Araujo-Febres¹

¹Departamento de Zootecnia, Facultad de Agronomía, Universidad del Zulia, Apartado 15205, Maracaibo ZU 4005.
² Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas (INIA), Estación Local El Guayabo, Zulia, Venezuela. E-mail: j_vergara@cantv.net

RESUMEN

Parcelas de 1 m² de Brachiaria humidicola (Rendle) Schweick se cortaron a los 14, 28, 42, 56, 70, 84 y 98 días de edad, para determinar la producción de materia seca, composición química y degradabilidad in situ, en las épocas seca (ES) y lluviosa (EL). Se determinaron la materia seca (MS), proteína cruda (PC), fibra detergente ácido (FDA), fibra detergente neutro (FDN) y lignina (Lig) en las muestras de campo. Se utilizaron dos toretes fistulados en el rumen para la evaluación de la degradabilidad in situ de la MS y PC. La producción se incrementó (P<0,05) desde 1.099,3 kg ha^–1 corte^–1 (14d) hasta 2.654,0 kg ha^–1 corte^–1 (98d) y desde 1.547,1 kg ha^–1 corte^–1 (14d) hasta 3.092,7 kg ha^–1 corte^–1 (98d) en ES y EL respectivamente. La MS se incrementó (P<0,05) de 41,1% (14d) a 47,7% (98d) durante ES y de 35,7% (14d) a 43,0% (98d) durante EL. La MO permaneció constante durante ES (89,0%), mientras que en EL se incrementó (P<0,05) de 84,7% (14d) a 90,3% (98d). La PC disminuyó (P<0,05) de 6,6% (14d) a 4,8% (98d) y de 8,5 (14d) a 4,3% (98d) en ES y EL respectivamente. La FDN permaneció constante entre edades (70,6% y 76,0% para ES y EL, respectivamente). La FDA en EL (37,9%) fue mayor (P<0,05) que en ES (40,5%). La Lig permaneció constante en ES (4,38%), mientras que en EL se incrementó de 5,0% (14d) a 6,3% (98d). La desaparición de MS no fue diferente entre edades de corte, pero sí entre épocas.

Palabras clave:  Brachiaria humidicola, rendimiento, composición química, degradabilidad ruminal, bosque seco tropical.

ABSTRACT

The change in chemical composition, dry matter yield, and in situ degradability of Brachiaria humidicola grass cut at 14, 28, 42, 56, 70, 84, and 98 days of regrowth, during dry (DS) and rainy seasons (RS). Dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), acid detergent fiber (ADF), neutral detergent fiber (NDF) and lignin (L) were determined. Two young bulls rumen fistulated were used to evaluate in situ degradability of dry matter and crude protein. DM yield increased (P<0.05) from 1,099 kg ha^–1 (14 d) to 2,654 kg ha^–1 (98 d) during DS and from 1,547 kg ha^–1 (14 d) to 3,092 kg ha^–1 (98 d) during RS. OM kept constant during DS (89%), but increased (P<0.05) from 84.7% to 90.3% during the RS. CP decreased from 6.6% (14 d) to 4.8% (98 d), and from 8.5% (14 d) to 4.3% (98 d) to DS and RS, respectively. FDN remained constant throughout cutting ages and seasons. FDA was higher (P<0.05) for DS (37.9%) than RS (40%). Lignin kept constant in DS but increased (P<0.05) from 5.0 to 6.3% in RS. Rumen DM disappearance was not different between cutting ages but it was affected by seasons (DS: 75.24% vs RS: 78.06%), respectively.

Key words:  Brachiaria humidicola, yield, chemical composition, ruminal degradability, dry tropical forest.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 249 - 256, 2006

COMPORTAMIENTO PRODUCTIVO Y FERMENTACIÓN RUMINAL
DE CORDEROS SUPLEMENTADOS CON HARINA DE COCOÍTE (Gliricidia sepium), MORERA (Morus alba)
Y TULIPÁN (Hibiscus rosa-sinensis)

Productive Lambs Performance and Ruminal Fermentation Using Cocoíte (Gliricidia sepium), Morera (Morus alba) and Tulipan (Hibiscus rosa-sinensis) Meal as Supplement

Miguel A. Mata Espinosa ¹, David Hernández Sánchez ², Mario A. Cobos Peralta ¹, María Esther Ortega Cerrilla ¹,
Germán D. Mendoza Martínez ¹ y José Luis Arcos-García ³

¹Programa de Ganadería, Colegio de Postgraduados. Km 36,5 Carretera México-Texcoco, Montecillo, México. CP 56230.
²Área de Ciencia Animal, Colegio de Postgraduados, Campus Tabasco. Km 3,6 Carretera Cárdenas-Huimanguillo,
H. Cárdenas, Tabasco, México. CP 86500. Fax: 01 937 37 22297. E-mail: sanchezd@colpos.mx
³Departamento de Zootecnia. Universidad del Mar, Campus Puerto Escondido. Oaxaca, México. CP 71980.

RESUMEN

Para conocer el efecto de suplementación con harina de tres arbustivas forrajeras tropicales, en el comportamiento productivo y fermentación ruminal de corderos en crecimiento, se realizó un estudio durante 90 días, utilizando 30 corderos con encaste de Pelibuey y Black Belly (18,29 ± 1,56 kg PV), mantenidos en pastoreo continuo en estrella africana (Cynodon plestostachyus; 75,5% FDN y 6,1% PC) de 7:00 a.m. a 4:00 p.m, posteriormente los animales fueron alojados en corraletas individuales, proporcionándoles 200 g animal^–1 d^–1 de suplemento de acuerdo a los tratamientos (T) evaluados: T₁ = sólo pastoreo (SP), T₂ = T₁+concentrado comercial (CC), T₃ = T₁+harina de cocoíte (Gliricidia sepium; HC), T₄ = T₁+harina de morera (Morus alba; HM) y T₅ = T₁+harina de tulipán (Hibiscus rosa-sinensis; HT). Las variables registradas fueron: consumo de suplemento y pasto, ganancia diaria de peso (GDP), digestibilidad aparente de materia seca del suplemento y del pasto. En fluido ruminal se midió pH, concentración de ácidos grasos volátiles, nitrógeno amoniacal, bacterias totales y protozoarios. El CC y la HT presentaron el mejor (P < 0,05) consumo de suplemento (CC, 181,6^a; HC, 97,7^c; HM, 149,7^b; HT, 167,2^ab g d^–1), de materia seca total (SP, 789,1^b; CC, 976,8^a; HT, 941,8^a g d^–1) y la mejor GDP (SP, 46,1^b; CC, 81,6^a; HT, 77,1^a; g d^–1). El CC propició la más alta (P < 0,05) digestibilidad aparente de la materia seca (DAMS, 60,97^a); en contraste la más baja (P < 0,05) DAMS se presentó con el uso de HC (SP, 49,27^ab; CC, 54,00^a; HC, 48,52^C; HM, 50,47^ab; HT, 50,54^ab). En las variables ruminales, no se observaron diferencias entre tratamientos para pH, nitrógeno amoniacal y AGV; solamente se registraron cambios (P < 0,05) en la concentración (1 × 10⁸ mL^–1) de bacterias totales (SP, 45,0^a; HM, 1,1^b) y de protozoarios (SP, 20,73^b; CC, 96,01^a; 1 × 10⁴ mL^–1). La harina de tulipán mostró una respuesta similar a la del CC. La menor respuesta se obtuvo con HC. Por lo anterior se recomienda HT como sustituto de CC para corderos en pastoreo en el trópico.

Palabras clave:  Corderos, suplementación, Gliricidia sepium, Morus alba, Hibiscus rosa-sinensis.

ABSTRACT

A study was carried out in order to determine the effect of a commercial feed and three different meals produced by tropical forage shrubs, on productive performance, digestibility and some rumen variables, when used as supplements for grazing lambs. Thirty crossbreed (Pelibuey X Black Belly) male lambs (18.29 ± 1.56 Kg BW), were used in a 90 d study. Animals were on continuous grazing of African star (Cynodon plestostachyus; (75.5% NDF, 6.1% CP) from 7:00 am to 4:00 pm. After grazing animals were housed in individual pens and fed (200 g animal^–1 d^–1) any of four supplements, according to treatment: T1 = grazing (G); T2 = T1 + commercial concentrate (CC); T3 = T1 + cocoite meal (Gliricidia sepium; CM); T4 = T1 + morera meal (Morus alba; MM), and T5 = T1 + tulipan meal (Hibiscus rosa-sinensis; TM). Supplement and forage intake, dry matter digestibility and daily weight gain, were measured. Volatile fatty acids (VFA), ammonia nitrogen concentration, total bacteria and protozoa were determined in rumen liquor. Differences in supplement intake (P < 0.05) (CC, 181.6^a; CM, 97.7^c; MM, 149.7^b; TM, 167.2^ab g d^–1), dry matter intake (OG, 789.1^b; CC, 976.8^a; TM, 941.8^a g d^–1) and daily weight gain (OG, 46.1^b; CC, 81.6^a; TM, 77.1^a; g d^–1) were found. The highest (P < 0.05) percentage of dry matter digestibility (DMD) was found for CC (CC, 60.97^a). Forage DMD was the lowest for CM (OG, 49.27^ab; CC, 54.00^a; CM, 48.52^C; MM, 50.47^ab; TM, 50.54^ab). No differences (P > 0.05) were found for rumen pH, ammonia nitrogen and VFA concentration among treatments. Compared with OG treatment, supplementation with MM decreased (P < 0.05) total bacteria concentration (OG, 45.0^a vs MM, 1.1^b × 10⁸ mL^–1) whilst CC increased protozoa concentration (OG, 20.73^b vs CC, 96.01^a × 10⁴ mL^–1). Supplementation with TM showed similar results that those observed with CC. The lowest response was observed for CM and OG. It is concluded that TM can be used as a supplement instead of CC in the tropic for grazing lambs.

Key words: Lambs, supplementation, Gliricidia sepium, Morus alba, Hibiscus rosa-sinensis.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 257 - 263, 2006

SUPLEMENTACIÓN DE MAUTAS MESTIZAS DE CRÍA CON HENO
DE GUINEA (Panicum maximum, Jacq.) Y UNA MEZCLA ALIMENTICIA DE YACIJA, HARINA DE MAÍZ,
AFRECHILLO DE TRIGO Y SALES MINERALES

Supplementation of Crossbred Young Heifers with Panicum maximum Hay
and a Feed Mix Ofbroiler Litter, Corn Meal, Wheat Bran and Minerals

Alfredo Caraballo ¹, Miriam de Acurero ¹, Jazmín Florio ², Abdenago Fuenmayor ³, Manuel F. Pirela ⁴ e Ignacio González ¹

¹INIA-Zulia. Planta Sede Km 6 carretera Maracaibo-Perijá, Edo. Zulia, Venezuela. acaraballo@inia.gov.ve /Alfredo_c@antv.net ²INIA-Barinas. Campo Experimental Ciudad Bolivia, Carretera Barinas-San Cristóbal, Troncal 5, Km 7.
³INIA-Zulia. Estación Local Chama, vía El Vigía. ⁵INIA-Zulia. Estación Local Carrasquero, vía El Moján.

RESUMEN

Para evaluar el efecto de la suplementación alimenticia durante la época seca sobre la ganancia diaria de peso (GDP) y la ganancia total de peso (GTP) en 24 mautas mestizas de la región de Perijá, estado Zulia, con peso inicial aproximado de 200 Kg, repartidas en 3 grupos: T₁ (2,5 Kg /100 Kg PV de mezcla + heno de guinea (Panicum maximum,Jacq) ad libitum; T₂ (1,5 Kg /100 Kg PV de mezcla + heno de guinea ad libitum) y T₃ (heno de pasto guinea ad libitum). La mezcla alimenticia estaba conformado por 40% de yacija, 40% de harina de maíz, 18% afrechillo de trigo y 2% de sales minerales. El ensayo tuvo una duración de 188 días (14 días de acostumbramiento al consumo de la mezcla, confinamiento de 78 días y posteriormente los animales fueron a pastoreo sin suplementación, en iguales condiciones de manejo, durante 96 días). Se realizó ANAVAR para cada variable y la diferencia entre medias fue analizada con la prueba de Tukey. Durante el confinamiento se presentó una GDP (P < 0,01) de 615 g/animal/día (T₁), 289 g/animal/día (T₂) y –80 g/animal/día (T₃). En el pastoreo se evidenció efecto significativo en la GDP (P < 0,05) entre tratamientos. Se detectó diferencias entre T₁ (228 g/animal/día) y T₃ (357 g/animal/día), pero no entre T₂ (290 g/animal/día) y T₃. T₁ fue superior (P < 0,01) que los otros tratamientos al provocar una GTP de 69,9 Kg vs. 50,4 y 28,0 para T₂ y T₃, respectivamente; asimismo, T₁ fue superior (P < 0,05) en cuanto al costo de 1 Kg de aumento de peso animal, con valores de Bs. 4.669,6 para (T₁) vs. 6.476,3 y 11.657,2 para T₂ y T₃, respectivamente.

Palabras clave: Panicum maximum, heno, suplementación estratégica, mautas, yacija.

ABSTRACT

A feeding trial was conducted to evaluate the effect of nutritional supplementation during dry season on the average daily gain (ADG) of 24 crossbred young heifers, from Perijá region, with approximated initial weight of 220 Kg, distributed in 3 groups: T1 (2.5 kg/100 Kg LW of supplement + Panicum maximum Jacq. hay ad libitum); T2 (1.5 kg/100 Kg LW of supplement + Panicum maximum Jacq. hay ad libitum) and T3 (Guinean hay ad libitum). The nutritional mixture was conformed by broiler litter (40%), corn meal (40%), wheat bran (18%) and salt - minerals (2%). The experiment was carried on during 188 days (14 days to get used to the consumption of mixture, 78 days of confinement and than 96 days of grazing in same conditions with out supplementation. It was made ANOVA for each variable and the differences between treatments were analyzed by Tukey. There was a significant difference (P < 0.01), between treatments during confinement: 615 g/animal/day (T₁), 289 g/animal/day (T₂) and –80 g/animal/day (T₃). On the grazing period there was significant difference (P < 0.05), for ADG between treatments. There were differences between T₁ (228 g/animal/day) and T₃ (357 g/animal/day), but not between T₂ (290 g/animal/day) and T₃. For total weight gain during the experiment, T₁ was superior (P < 0,01) from other treatments (69,9 Kg of total weight gain) vs. 50,4 Kg (T₂) and 28,0 Kg (T₃).

Key words: Panicum maximum, hay, supplementation, young heifers, broiler litter.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 264 - 272, 2006

CONCENTRACIONES SANGUÍNEAS DE CALCIO, FÓSFORO
Y MAGNESIO EN MAUTAS MESTIZAS (Taurus-Indicus) SUPLEMENTADAS ESTRATÉGICAMENTE DURANTE EL PERIODO PERIPUBERAL

Blood Levels of Calcium, Phosphorus, and Magnesium in Crossbred Heifers (Taurus-Indicus) Strategically Fed During Peripuberty Period

Silvio Miranda López¹, Decio González¹, Nidia Rojas¹ y Gloria Villalobos²

¹Departamento de Producción e Industria Animal, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. smiranda2002@yahoo.es. ²Egresado de la Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela.

RESUMEN

Con el objetivo de examinar las concentraciones sanguíneas de calcio, fósforo y magnesio durante el período peripuberal en mautas bajo pastoreo y suplemententadas con dos estrategias alimenticias (Alimento balanceado comercial y un suplemento con Gliricidia sepium), se realizó un experimento con 24 animales mestizos doble propósito, distribuidos en forma aleatorizada en 3 grupos de 8 animales cada uno, los cuales constituyeron los tratamientos a saber: T1: consumo de gramíneas a pastoreo (CGP); T2: CGP + el consumo de alimento balanceado comercial y T3: CGP + el consumo de un suplemento alimenticio que contenía harina de hojas de Gliricidia sepium (GS). Se recolectaron muestras de suero sanguíneo, 2 semanas antes y 2 semanas después de la pubertad para determinar la concentración de calcio, fósforo y magnesio. Los datos fueron analizados a través de un análisis de varianza del sistema de análisis estadístico (SAS) empleando el procedimiento GLM. Las concentraciones sanguíneas de P y Mg observados en las semanas 2 (6,27 y 2,53 mg/dL, respectivamente), 3 (6,41 y 2,55 mg/dL, respectivamente), 4 (6,31 y 2,60  mg/dL, respectivamente) y 5 (6,39 y 2,49 mg/dL, respectivamente) superan (P < 0,01) a los mostrados en las semanas 1 (5,07 y 1,30 mg/dL, respectivamente). Particularmente el Ca sérico durante las semanas 3 (11,60 mg/dL), 4 (11,43 mg/dL) y 5 (11,72 mg/dL) fue superior (P < 0,01) que las semanas 1 (9,68 mg/dL) y 2 (10,80 mg/dL). Las mautas de T2 y T3, presentaron concentraciones sanguíneas de Ca, P y Mg, superiores (P < 0,01) a las observadas en T1. En atención a los resultados de la presente investigación, los niveles sanguíneos de Ca, P y Mg, se incrementaron una semana antes de la pubertad, siendo esto niveles mantenidos hasta la última semana del periodo peripuberal. El alimento balanceado comercial y el suplemento alimenticio con GS, fueron efectivos en aumentar las concentraciones sanguíneas de Ca, P y Mg.

Palabras clave: Mautas, pubertad, minerales, calcio, fósforo, magnesio.

ABSTRACT

With the objective of examining serum concentrations of calcium, phosphorus and magnesium during the peripuberal period in grazing heifers feeding two supplemental strategies (balanced commercial food and Gliricidia sepium), An experiment was carried out with 24 dual purpose crossbred heifers, distributed in 3 randomized groups (8 animals each): T1: gramineous grazing (CGP); T2: CGP + commercial balanced food and T3: CGP + nutritional supplement that contained flour of leaves of Gliricidia sepium (GS). Serum samples were taken, 2 weeks before and 2 weeks after the puberty to determine the concentration of calcium, phosphorus and magnesium. The data was analyzed by an analysis of variance of the statistical analysis system (SAS) using the procedure GLM. The serum concentrations of P and Mg observed in the weeks 2 (6.27 and 2.53 mg/dL, respectively), 3 (6.41 and 2.55 mg/dL, respectively), 4 (6.31 and 2.60 mg/dL, respectively) and 5 (6.39 and 2.49 mg/dL, respectively) were higher (P < 0.01) to those shown in the weeks 1 (5.07 and 1.30 mg/dL, respectively). Particularly the serum Ca during the weeks 3 (11.60 mg/dL), 4 (11.43 mg/dL) and 5 (11.72 mg/dL) it was superior (P < 0.01) that the weeks 1 (9.68 mg/dL) and 2 (10.80 mg/dL). Heifers of T2 and T3, showed higher serum concentrations of Ca, P and Mg presented (P < 0.01) compared to those observed in T1. In attention to the results of the present investigation, the serum levels of Ca, P and Mg, were increased one week before the puberty, being this levels maintained until the last week of the peripuberal period. The commercial balanced food and the nutritious supplement with GS, were effective in increasing the serum concentrations of Ca, P and Mg.

Key words: Heifers, puberty, minerals, calcium, magnesium, phosphorus

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 273 - 281, 2006

DESARROLLO DE EMBRIONES CAPRINOS IN VITRO:
EFECTO DEL CO-CULTIVO CON CÉLULAS EPITELIALES DE OVIDUCTO

In Vitro Development of Goat Embryos: Effect of Co-culture with Oviductal Epithelial Cells

Pablo Bosch ¹, María S. Blanch ¹, Susana Ferrero ², Hernán Díaz ¹, Fernando Piccatto ¹ y Ricardo A. Bosch ¹

¹Departamento de Reproducción Animal, Facultad de Agronomía y Veterinaria.
²Departamento de Matemática, Facultad de Ciencias Exactas Físico-Químicas y Naturales,
Universidad Nacional de Río Cuarto. Córdoba, Argentina. boschp@gmail.com.

RESUMEN

El desarrollo de sistemas de cultivo in vitro que permitan obtener altos porcentajes de embriones viables es de gran importancia para la implementación de biotecnologías como el clonado y la transferencia de genes. Estudios tendientes a mejorar la eficiencia de los sistemas de cultivo embrionario son especialmente importantes en ganado caprino por el escaso desarrollo de estos métodos en dicha especie. El objetivo del presente estudio fue comparar el desarrollo de embriones caprinos fecundados in vivo cultivados: a) con células epiteliales de oviducto caprino (CEO), b) en fluido sintético de oviducto (SOF; del Inglés: synthetic oviduct fluid) o c) en medio condicionado por células epiteliales de oviducto caprino (MC). Embriones de 1-8 células colectados del oviducto de cabras superovuladas se cultivaron in vitro durante 4-5 días en los diferentes tratamientos. Al término del cultivo se estableció el estadio de desarrollo embrionario alcanzado y el número de células por embrión a partir de embriones teñidos con lacmoid. Un mayor porcentaje de embriones se desarrollaron hasta el estado de mórula/blastocisto en cocultivo comparado con los cultivados en SOF (75% vs. 41% respectivamente; P < 0,05) o MC (5,5%); mientras que el SOF resultó superior al MC para sustentar el desarrollo de los embriones caprinos hasta mórula/blastocisto. Los embriones producidos en cocultivo con CEO tenían más células que los cultivados en SOF (15,3 vs. 8,1 células/embrión; P < 0,05) y estos últimos más que los cultivados en MC. La viabilidad de los embriones generados en SOF se confirmó mediante transferencia a una cabra receptora, seguido por el nacimiento de 2 cabritos. En conclusión el cocultivo con CEO brinda mejores condiciones para sustentar el desarrollo in vitro de embriones caprinos en relación con los otros dos sistemas estudiados.

Palabras clave: Embrión, cultivo in vitro, ganado caprino, cabras, oviducto, sincronización del estro.

ABSTRACT

Development of reliable in vitro culture systems to produce high percentages of viable embryos is instrumental in the application of biotechnologies such as cloning and transgenesis. This is especially true for caprine species in which in vitro technology for embryo culture has been poorly developed. The objective of this study was to compare in vitro development of in vivo fertilized caprine embryos in: a) coculture with caprine oviductal epithelial cells (OEC), b) synthetic oviduct fluid (SOF), or c) medium conditioned by oviductal epithelial cells (CM). In vivo fertilized 1-8 cell caprine embryos collected by oviductal flushing were allocated to treatments and cultured for 4-5 days in vitro. At the end of the culture period, embryonic development was recorded and the number of cells per embryo was determined in lacmoid-stained embryos. A significantly higher percentage of embryos reached the morula/blastocyst stage in coculture compared with those cultured in SOF (75% vs. 41% respectively; P < 0.05) or CM (5.5%); SOF was superior to CM to supporting goat embryo development. Likewise, embryos grown in coculture with OEC had more cells than those cultured in SOF (15.3 vs. 8.1 cells/embryo; P < 0.05). Cell counts were higher in embryos cultured in SOF than those originated from CM. In conclusion, coculture of goat embryos with OEC provided superior conditions to support in vitro development of early-stage goat embryos compared with the other treatments studied.

Key words: Embryo, in vitro culture, caprine, goat, oviduct, estrous synchronization.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 282 - 287, 2006

ANÁLISIS DE REGRESIÓN LOGÍSTICA PARA DATOS CORRELACIONADOS UTILIZANDO TRES PROCEDIMIENTOS
DEL SISTEMA ESTADÍSTICO SAS

Logistic Regression Analysis For Correlated Data Using Three Procedures
of the SAS Statystical System

José Candelario Segura Correa¹, José de Jesús Solis Calderón² y Víctor Manuel Segura Correa²

Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma de Yucatán. Km 15,5 carrera Mérida-Xmatkuil.
Mérida, Yucatán, México. E-mail segura52@hotmail.com. Fax: +52 9999 423205.
²Centro de Investigación Regional del Sureste, INIFAP. Km 25 carretera Mérida-Motul, C.P. 97454. Mocochá, Yucatán, México

RESUMEN

El objetivo de este estudio fue comparar los resultados de regresiones logísticas para datos correlacionados obtenidos mediante tres procedimientos del sistema de análisis estadístico (SAS). Se utilizó la información de un estudio transversal sobre rinotraqueitis infecciosa bovina en el estado de Yucatán, México, donde la unidad de muestreo fue el hato y la unidad de interés el animal. Los datos se analizaron mediante los procedimientos LOGISTIC, GENMOD y NLMIXED del SAS. El modelo logístico utilizado incluyó los factores de riesgo: tamaño de hato (£75, 76-147, 148-261, 262-480 animales) y etapa de vida del animal (crecimiento, desarrollo y producción). Se obtuvieron las razones de probabilidad (OR) e intervalos de confianza al 95% (IC95). También se calcularon las razones de probabilidad (OR) e IC95 utilizando regresiones logísticas estándar como referencia. Los ORs para tamaño de hato: £75, 76-147, 148-261 y 262-480 animales, utilizando los procedimientos LOGISTIC, GENMOD y NLMIXED fueron: 0,34; 0,68; 0,62 y 1; 0,34; 0,63; 0,63 y 1; y 0,29; 0,62; 0,57 y 1, respectivamente; y para los animales en crecimiento, desarrollo y producción fueron: 0,12; 0,15 y 1; 0,15; 0,17 y 1; y 0,12; 0,14 y 1, respectivamente. Los menores IC95 fueron para los ORs de la regresión logística estándar y los mayores para los OR obtenidos mediante el procedimiento NLMIXED. En conclusión, los tres procedimientos ajustaron por el efecto de hato siendo el más estricto NLMIXED.

Palabras clave: Regresión logística, modelo marginal, modelo aleatorio.

ABSTRACT

The objective of this study was to compare the results of logistic regressions for correlated data obtained by using three procedures of the Statistical Analysis System package (SAS). Information from a cross sectional study on infectious bovine rhinotracheitis in Yucatan state, Mexico, was used; where the sampling unit was the herd and the unit of interest was the animal. Data were analyzed by using the LOGISTIC, GENMOD and NLMIXED procedures of the SAS. The logistic model used included the risk factors: herd size (£75, 76-147, 148-261, 262-480 animals) and stage of life (growth, development and production). The odd ratios (OR) and 95% confidence intervals (CI95) were obtained. Also the OR and CI95 for the risk factors were estimated using ordinary logistic regression as a reference. The ORs for herd size £75, 76-147, 148-261 y 262-480 animals, using LOGISTIC, GENMOD and NLMIXED procedures were: 0.34, 0.68, 0.62 and 1; 0.34, 0.63, 0.63 and 1; and 0.29, 0.62, 0.57 and 1, respectively; and for the animals in the stage of growth, development and production were: 0.12, 0.15 and 1; 0.15, 0.17 and 1; and 0.12, 0.14 and 1, respectively. The narrower CI95 were for the ORs from the ordinary logistic regression and the widest for the OR obtained using the NLMIXED procedure. In conclusion, the three procedures adjusted for herd effect, being the most precise those of the NLMIXED procedure.

Key words: Logistic regression, marginal model, random model.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 288 - 296, 2006

CRECIMIENTO PRE-DESTETE EN HEMBRAS BOVINAS
DOBLE PROPÓSITO

Pre-weaning Growth of Dual Purpose Bovine Females

Carlos González-Stagnaro¹, María A. Rodríguez-Urbina¹, Javier Goicochea-Llaque², Ninoska Madrid-Bury ¹
y Decio González-Villalobos²

¹Facultad de Agronomía. ² Facultad de Ciencias Veterinarias.
Universidad del Zulia, Apartado 15205. Maracaibo 4005-A, Venezuela. E-mail: cagonzalez@luz.edu.ve

RESUMEN

Para evaluar el crecimiento predestete de las hembras bovinas de reemplazo incorporadas al Programa de Medicina de la Producción y Control Reproductivo, se analizaron 2.511 datos pertenecientes a 18 fincas de doble propósito ubicadas en la Cuenca del Lago de Maracaibo, estado Zulia, Venezuela. Se midió el efecto de la zona (El Laberinto, Perijá, Costa Oriental, Sur del Lago), predominio racial (Holstein, Pardo Suizo, Brahman, Carora), sistema de manejo: mejorado (SM) y tradicional (ST) y la época de nacimiento (enero-marzo, abril-junio, julio-septiembre, octubre-diciembre) sobre la edad (ED), peso (PD) y ganancia diaria de peso (GDP) al destete y sus interacciones. Los datos se analizaron con el procedimiento lineal general del paquete estadístico SAS. Las becerras en los SM presentaron ED y PD de 9,7 ± 0,1 m y 162,2 ± 1,1 kg, siendo GDP superior en 11,8% (54, 9 g/d) a los ST (P < 0,001). La zona Perijá mostró la menor ED (9,3 ± 0,2 m) y un mayor PD (179,0 ± 0,9 kg) (P < 0,001). La interacción predominio racial × zona (P < 0,001) y por sistema (P < 0,001) afectaron el PD, siendo más elevada en las Pardo Suizo en Perijá y en El Laberinto (184,3 ± 2,2 kg y 168,9 ± 2,9 kg), a la vez que la interacción época de nacimiento x zona afectó (P < 0,01) ED, PD y GDP. La relación ambiente-genotipo en la expresión del crecimiento, mostró ser significativa y variable, por lo cual es indispensable considerar el manejo y el control del crecimiento para optimizar el futuro desempeño reproductivo y productivo de las hembras bovinas.

Palabras clave: Medicina de la producción, crecimiento pre-destete, becerras, época.

ABSTRACT

Pre-weaning growth of bovine female replacements incorporated to the Medicine Production and Reproductive Control Program was evaluated. A total of 2,511 data from 18 dual purpose farms, located on the basin of the Maracaibo Lake, at Zulia state, Venezuela, was analyzed. The effect of zone (El Laberinto, Perija, Costa Oriental del Lago, Sur del Lago), breed predominance (Holstein, Brown Swiss, Brahman, Carora), management system: improved (SM) and traditional (ST) and birth season (January-March, April-June, July-September, October-December) on age (ED), weight (PD) and daily weight gain (GDP) at weaning, as well as, its interactions were studied. For statistical analysis, Proc GLM of SAS software was used. In SM, the ED and PD were 9.7 ± 0.1 m and, 162.2 ± 1.1 kg, with GDP 11.8% (54.9 g/d) higher than in ST (P < 0.001). Perija zone had lower ED (9.3 ± 0.2 m) and higher PD (179.0 ± 0.9 kg) (P < 0.001). Both breed predominance x zone (P < 0.001) and breed predominance x management system interactions (P < 0.001) affected PD, been higher in Brown Swiss in Perija and El Laberinto (184.3 ± 2.2 kg. and 168.9 ± 2.9 kg). Also, season of birth x zone interaction, affected ED, PD and GDP (P < 0.001). The environment-genotype relationship had an influence on growth that showed to be significant and of great variability. Therefore, it is relevant to consider management and control of growth to optimize reproductive and productive performance of bovine females.

Key words: Production medicine, pre-weaning weight, yearling calves, season.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 297 - 307, 2006

DETERMINACIÓN MICROBIOLÓGICA Y MOLECULAR DE Listeria sp. Y Listeria monocytogenes EN CERDAS A NIVEL DE UNA PLANTA BENEFICIADORA EN EUA

Microbiological and Molecular Detection of Listeria spp. and Listeria monocytogenes
in a Cull Sows Process Plant in USA

Fernando H. Rivera P.¹, Irene Wesley ², Scott Hurd ², David Simoes ¹, Alix Sosa³ y Sergio Rivera ¹

¹Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. ²National Animal Disease Center, USDA-ARS, USA.
³ Laboratorio de Referencia Las Naciones (LARNACA). Maracaibo, Venezuela. E-mail: privera@luz.edu.ve

RESUMEN

Con el objeto de comparar la técnica de PCR múltiple con el método microbiológico comercial para la determinación de la presencia de Listeria spp. y Listeria monocytogenes en alimentos, se llevó a cabo un muestreo en una planta procesadora de cerdas de descarte ubicada en Estados Unidos de Norteamérica (EUA). A 160 cerdas sacrificadas, se le tomaron muestras de ganglios sub-ilíacos, ganglios ileocecales, contenido cecal e hisopado de la superficie de las canales. Adicionalmente se tomaron muestras del ambiente de la planta y de cortes de carne. Un total de 708 muestras se procesaron con ambas técnicas. Mediante técnicas microbiológicas, el 5,2% resultaron positivas a Listeria spp. y el 0,14% a L. monocytogenes. Mediante la técnica de PCR 4,1% resultaron positivas a Listeria spp. y 0,85% positivas a L. monocytogenes. No se observó diferencias significativas (P ³ 0,05) entre estos valores. Se determinó una incidencia del 1,9% de Listeria spp. en los hisopados de la superficie de las canales de las cerdas evaluadas. Por otro lado, se identificó L. monocytogenes, en el 5% de las muestras de cortes de carne. En relación a los ganglios, los sub-ilíacos presentaron 6,3% de incidencia a Listeria spp. y de 1,3% a L. monocytogenes no encontrándose en ganglios ileocecales. Para el contenido cecal la incidencia a Listeria spp. fue de 19% y para L. monocytogenes fue de 2,5%. En el ambiente el 4,2% de las muestras resultaron positivas a Listeria spp. y ninguna a L. monocytogenes. Al comparar los resultados logrados entre ambas técnicas no hubo diferencia significativa entre los valores obtenidos con las muestras de los hisopados de las canales y la de los ganglios ileocecales. Si hubo diferencia significativa entre los resultados de contenido cecal P = 0,0168 < 0,05 y de los ganglios sub-ilíacos P = 0,0038 < 0,05. La utilización de la técnica de PCR múltiple, permitió que los resultados se obtuvieran en 8 h, luego del segundo período de enriquecimiento de cada muestra, y con el método microbiológico convencional el procedimiento tomó 8 días. La incorporación de la metodología molecular en el proceso de verificación del status microbiológico en la industria de alimentos, resulta una mejora para la efectividad y la dinámica en los sistemas de seguridad alimentaria.

Palabras clave: Cerdos, Listeria spp., L. monocytogenes, PCR múltiple, seguridad alimentaria, HACCP.

ABSTRACT

Listeria spp. and Listeria monocytogenes presence in a cull sows processor plant in USA, was evaluated by and PCR multiplex method. 160 cull sows were surveyed after slaughter. Samples were collected from sub-iliac node, iliocecal node, cecal content and carcass swabs. Additionally samples were taken from environment plant and from raw meat ready to be processed. A total of 708 samples were processed. Using traditional microbiology method were found 5.2% of samples positive to Listeria spp. and 0.14% to L. monocytogenes. With PCR multiplex 4.1% were positive to Listeria spp. and 0.85% to L. monocytogenes. There was not significant difference (P ³ 0.05) in the results obtained with PCR multiplex and traditional microbiology procedures. In relation with the raw material that leaves the slaughter area to be processed inside the same plant, Listeria spp. was observed in 1.9% swabs carcass, and 5% of raw sow meat sampled. Listeria spp. was identified in 6.3% and L. monocytogenes in 1.3% of subiliac nodes. It was not any iliocecal node positive to Listeria. Samples supposedly related with the infection source in the process plant, cecal content sample were 19% positive to Listeria spp. and 2.5% to L. monocytogenes. Environmental samples were 4.2% positive to Listeria spp. There were not differences between the conventional microbiology procedure and PCR multiplex technique for this pathogen when carcass swabs and ilicecal node were evaluated with both techniques. Differences were observed between the samples from cecal content and sub-iliac node P = 0.0168 < 0.05 and P = 0.0038 < 0.05 respectively. With the PCR multiplex technique, results were obtained in 8 hours after the second enrichment culture period of the each sample. With traditional microbiological it took 8 days. The incorporation of molecular methodology in the verification process for microbiological controls in the food industry, would allow an important improvement of the effectiveness and dynamics in the food safety systems implanted at the food industries.

Key words: Cull sows, Listeria spp., L. monocytogenes, PCR multiplex, food safety, HACCP.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 308 - 314, 2006

ESTANDARIZACIÓN DE LA DETECCIÓN DEL GLICOMACROPÉPTIDO POR PAGE-SDS COMO ÍNDICE DE ADULTERACIÓN DE LECHE

Standardization Of Glycomacropeptide Detection with SDS-PAGE as a Milk Adulteration Index

Luz Mila Galindo-Amaya¹, Emiro Valbuena-Colmenares² y Evelin Rojas-Villarroel ²

¹Departamento de Química, Facultad de Humanidades y Educación.
²Unidad de Investigación en Ciencia y Tecnología de Alimentos, Facultad de Ciencias Veterinarias, Apartado 15252.
Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. E-mail: evalbuena@luz.edu.ve

RESUMEN

La electroforesis en gel de poliacrilamida dodecilsulfato de sodio (PAGE-SDS) se ha utilizado ampliamente para separar proteínas nativas y desnaturalizadas. En algunos países esta técnica ha sido útil para detectar adulteración de leche con suero de quesería, práctica que resulta fraudulenta según la normativa legal vigente. La presencia del glicomacropéptido (GMP) que es liberado al suero por acción de la renina sobre la k-caseína durante la elaboración del queso, en muestras de leche, constituye un marcador de este tipo de adulteración. En este trabajo se estandarizó la detección de este péptido como índice de adulteración de leche pasteurizada, mediante aislamiento del GMP por precipitación secuencial con ácido tricloroacético (ATC) al 24 y 50%; tratamiento con etanol-éter y resuspensión en buffer Tris-HCl 0,05 M, EDTA 1 mM, pH 7,2 a partir de muestras de suero dulce, suero ácido, leche cruda recién ordeñada, mezclas suero:leche, leches pasteurizadas y en polvo comercializadas en la región. Los precipitados fueron analizados por PAGE-SDS y el GMP se evidenció como un trímero de 20,9 kDa en muestras de suero dulce y mezclas de suero leche (1, 5, 10 y 50%), pero ausente en muestras de suero ácido y leche cruda fresca. El análisis de quince muestras de leche pasteurizada (marcas A, B, C, D y E) reveló la presencia del GMP en diez de ellas correspondientes a las marcas A, B, C y E; sin embargo en cinco muestras de leche en polvo (marcas F, G, H, I y K) este péptido no fue observado. Los resultados obtenidos demuestran que la detección del GMP por PAGE-SDS en leche, representa un parámetro específico y sensible para detectar porcentajes de adulteración con suero, a niveles tan bajos como 1%, algo que no puede ser revelado con la evaluación de los parámetros físico-químicos de la leche.

Palabras clave:  Adulteración de leche, suero, GMP, PAGE-SDS.

ABSTRACT

The poliacrylamide gel electrophoresis sodium dodecylsulfate (PAGE-SDS) has been extensively used to separate native and denaturalized proteins. In various countries this has been useful to detect milk adulteration with whey, which is a fraud according to the current legal standards. The presence of glicomacropeptide (GMP) constitutes a marker of adulteration. It is released to the serum due to the hydrolysis of k-casein peptide catalyzed by rennin incheese elaboration. In this work, the GMP detection was standardized as a pasteurized milk adulteration index, by means of GMP isolation with sequential precipitation in trichloroacetic acid at 24% and 50%, treatment with ethanol-ether and resuspention in buffer Tris-HCl 0.05 M, EDTA 1 mM, pH 7.2 from sweet whey, acid whey, recently drawn raw milk, mixtures of whey: milk; pasteurized milk and powder milk locally commercialized. Precipitates were analyzed by SDS-PAGE and GMP was evidenced as a trimer of 20.8 kDa in samples of sweet whey, and mixtures of whey: milk (1, 5, 10 and 50%), but absent in samples of acid whey and drawn raw milk. Analysis of fifteen samples of pasteurized milk (brands A, B, C, D and E) revealed the presence of GMP in ten of them, corresponding to brands A, B, C and E. Nevertheless after analyzing five samples of powder milk (brands F, G, H, I y K) this peptide was not observed. The results obtained demonstrate that investigation of GMP by SDS-PAGE in milk, constitute a sensible and specific parameter to detect milk adulteration with whey, to levels as low as 1%, something that can not be revealed only with the evaluation of the physical-chemical parameters of milk.

Key words:  Milk adulteration, whey, GMP, SDS-PAGE.

Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XVI, Nº 3, 315 - 324, 2006

OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE DOS CONCENTRADOS PROTEICOS A PARTIR DE BIOMASA DE Kluyveromyces marxianus var. marxianus CULTIVADA EN SUERO LÁCTEO DESPROTEINIZADO

Attainment and Characterization of Two Protein Concentrates from Biomass
of Kluyveromyces marxianus var. marxianus Grown in Deproteinized Whey

Marta Elena Cori de Mendoza¹, Nilo Rivas², Blas Dorta³, Emperatriz Pacheco de Delahaye⁴ y Antonio Bertsch⁵

^1,2,4,5Instituto de Química y Tecnología, Facultad de Agronomía, Universidad Central de Venezuela, Apdo. 4579. Maracay, 2101, Venezuela.
E-mail: martacori@cantv.net. Telf: (0243)-2465360,5507304. ³Instituto de Biología Experimental, Facultad de Ciencias, UCV.

RESUMEN

El presente trabajo se realizó con el propósito de obtener un concentrado proteico con un bajo contenido de ácidos nucleicos a partir de biomasa microbiana. Para ello se cultivó la levadura Kluyveromyces marxianus var. marxianus en lactosuero desproteinizado y suplementado con fuentes de nitrógeno y vitaminas a pH 4,5; 32 a 35°C y una tasa de aireación de 1,22 volúmenes de aire por volumen de medio por minuto (VVM). Se obtuvo un rendimiento promedio de: biomasa de 0,30 g/g lactosa, un consumo de lactosa del 93, 21% y concentración celular 4,15 g/L al final de la fermentación. A partir de la biomasa obtenida se elaboraron dos concentrados proteicos: uno por extracción alcalina y precipitación isoeléctrica (C1) y otro por extracción alcalina, fosforilación y precipitación isoeléctrica (C2). El análisis de los concentrados mostró diferencias significativas (P < 0,05) en los contenidos de cenizas, grasa, proteína cruda, nitrógeno no proteico, ARN y carbohidratos. Se evidenció una disminución significativa (P < 0,05) del contenido de ARN de 4,59% (C1) a 2,71% (C2) hecho importante para el uso de este concentrado proteico para el consumo humano. La fosforilación de la proteína (C2) incrementó la capacidad de absorción de agua (4,21 a 4,64 g agua/g proteína), la solubilidad (32,43 a 41,74 g proteína solubilizada/g proteína total), y la capacidad emulsionante (903,38 a 971,91 g aceite/g proteína), y disminuyó la capacidad de absorción de grasa (1,79 a 1,65 g grasa/g proteína), características éstas que deben ser consideradas para la incorporación de los concentrados proteicos como ingredientes de productos cárnicos y de panadería.

Palabras clave:  Lactosuero, Kluyveromyces marxianus, concentrado proteico, ARN.

ABSTRACT

This work was carried out with the purpose of attain a protein concentrate from microbial biomass with low content of nucleic acids. The yeast Kluyveromyces marxianus var. marxianus was grown on deproteinized and supplemented whey with nitrogen and vitamins sources at pH 4.5; 32 to 35°C and an aeration rate of 1.22 volumes of air fed for volume of broth per minute (VVM). The average biomass yield obtained was 0.30 g/g lactose, a lactose consumption of 93.21% and a cellular concentration of 4.15 g/L at the end of the fermentation. Two protein concentrates were obtained: the first one by alkaline extraction and isoelectric precipitation (C1) and the second one by alkaline extraction, phosphorylation and isoelectric precipitation (C2). Chemical analysis of both concentrates shown significant differences (P < 0.05) in the content of ash, fat, crude protein, non protein nitrogen, RNA and carbohydrates. There was significant (P < 0.05) the decrease in the RNA content from 4.59% (C1) to 2.71% (C2), important fact for the use of this protein concentrates for human consumption. Phosphorylation of the protein (C2) produced an increase in the water holding capacity (4.21 to 4.64 g water/g protein), solubility (32.43 to 41.74 g solubilized protein/g total protein) and emulsifying capacity (903.38 to 971.91 g oil/g protein), as well as a decrease in the oil absorption capacity (1.79 to 1.65 g oil/g protein). These characteristics are important when considering the use of such protein concentrates as ingredients in bakery or meat products.

Key words: Whey, Kluyveromyces marxianus, protein concentrate, RNA.